¡Descarga examen fluorescencia y más Exámenes en PDF de Bioquímica solo en Docsity! TÉCNICAS DE ANÁLISIS BIOQUÍMICO I CURSO 2011-12 DETECCIÓN Y CUANTIFICACIÓN Isótopos radiactivos 18.- A = A0 x e -λt Ln A/A0 = -λt Pendiente = –λ λ = 0.048 día-1 t1/2 = 0.693/λ t1/2 = 14.4 días Según la primera fórmula, tras 30 días quedarán: A = 25450 x e-0.048 x 30 A = 6030 dpm A/A0 x 100 = 23.7% 500 = 17000 x e-0.048 x t t = 73.5 días 19.- R(muestra) = 1450 cpm R(muestra + estándar) = 2878 cpm R(estándar en las condiciones de la muestra) = 2878 – 1450 = 1428 cpm Eficacia con la que se ha contado el estándar: E = (1428/5064) x 100 = 28% Luego la actividad absoluta de la muestra analizada será: A = R/E = 1450/0.28 = 5179 dpm 20.- A) t1/2( 14C) = 5736 año λ(14C) = 0.693/t1/2 = 2.3 x 10 -10 min-1 La máxima actividad específica se conseguirá cuando todos los núclidos sean de 14C. Supongamos 1 mol de glucosa (6 átomos de carbono y marcaje uniforme): A = λ x N = 2.3 x 10-10 x 6.023 x 1023 x 6 = 8.31 x 1014 dpm en un mol de glucosa. Smax = 8.31 x 1014 dpm/mol = 374.3 Ci/mol B) Primero se calcula la cantidad de glucosa que se ha pipeteado: 5 x 10-6 M x 10 x 10-6 L = 5 x 10-11 mol de glucosa A = 8.31 x 1014 dpm/mol x 5 x 10-11mol = 41550 dpm E = R/A x 100 = 29260 cpm/41550 dpm x 100 E = 70.4% C) disolución (a): 50 x 10-6 Ci; Sa = 200 Ci/mol por lo que en esta disolución hay 50 x 10 -6/200 mol = 0.25 x 10-6 mol disolución (b): 5 mM disolución (c): tampón disolución (d): 3 mM; Sd = 5 Ci/mol y en ella hay 50 x 10 -6 Ci por lo que hay 50 x 10-6/5 mol y tiene un volumen de 50 x 10-6/5/3 x 10-3 L = 3.34 mL Vd = 3.34 mL = Va + Vb + Vc Masad = 50 x 10 -6/5 mol = Masaa + Masab = 0.25 x 10 -6 mol + Masab Act.d = Act.a = 50 x 10 -6 Ci Masab = 9.75 x 10 -6 mol Vb = 9.75 x 10 -6/5 x 10-3 L = 1.95 x 10-3 L Vb = 1.95 mL Va la totalidad de la disolución que contiene los 50 Ci Vc hasta los 3.34 mL 21.- disolución (a): 1M; Sa = 2 mCi/mol disolución (b): 1M disolución (c): tampón disolución (d): 100 mM; Sd = 50000 cpm/mL; 1 L E = 40% Sd = 125000 dpm/mL Vd = 1 L = Va + Vb + Vc Masad = 100 x 10 -3 mol = Masaa + Masab = Va x 1 mol + Vb x 1 mol Act.d = 125000 x 1000 dpm = 125 x 10 6/60/3.7 x 1010 = 0.563 x 10-4 Ci = Act.a = = Va x 1 x 2 x 10 -3 Ci Va = 0.028 L 100 x 10-3 mol = 0.028 x 1 mol + Vb x 1 mol Vb = 0.072 L Vc = 1 – (0.028 + 0.072) L Vc = 0.900 L 22.- disolución (a): 2.1 x 107 cpm/mL; E = 70%; 3 x 107 dpm/mL 0.5 mM disolución (b): 0.1 mM disolución (c): tampón disolución (d): 10 M; Sd = 2 Ci/mol Vd = 1 L (por ejemplo) = Va + Vb + Vc Masad = 10 x 10 -6 mol = Va x 0.5 x 10 -3 + Vb x 0.1 x 10 -3 Act.d = 10 x 10-6 x 2 Ci = Va x 3 x 10 7x 103/60/3.7 x 1010 Ci Va = 0.00148 L = 1.48 mL 10 x 10-6 mol = 0.00148 x 0.5 x 10-3 + Vb x 0.1 x 10 -3 Vb= 0.09260 L = 92.60 mL Vc = 905.92 mL 23.- Rreal = Robs – Rfondo + (Robs) 2 x tm tm = 10 μs = 1.67 x 10 -7 min Rreal = 104000 - 55 + (104000) 2 x 1.67 x 10-7 Rreal = 105751 cpm 24.- 14C: λ= 0.693/t1/2 = 0.693/5736 año = 0.693/3 x 10 9 minuto = 2.3 x 10-10 min-1 La glicocola tiene 2 átomos de carbono. Por tanto: Smax = Amax/molGly = λ x N/molGly = 2.3 x 10 -10 min-1 x 2 x 6.023 x 1023 molGly = = 2.77 X 1014 dpm/molGly Acarbono = Rcarbono/E x 100 = 222/80 x 100 = 278 dpm Smax = 2.77 X 10 14 dpm/molGly = Acarbono/molGly = 278 dpm/molGly molGly = 10 -12 mol CGly-(14C) = molGly/Vol = 10-12 mol/10-6 L = 10-6 M CGly-(14C) = 1 μM 3H: λ= 0.693/t1/2 = 0.693/12.26 años = 0.693/6.4 x 10 6 minutos = 1.075 x 10-7 min-1 La glicocola tiene 5 átomos de hidrógeno. Por tanto: Smax = Amax/molGly = λ x N/molGly = 1.075 x 10 -7 min-1 x 5 x 6.023 x 1023 molGly = = 3.24 X 1017 dpm/molGly Atritio = Rtritio/E x 100 = 132800/40 x 100 = 332000 dpm Smax = 3.24 X 10 17 dpm/molGly = Atritio/molGly = 332000 dpm/molGly molGly = 10 -12 mol CGly-(3H) = molGly/Vol = 10-12 mol/10-6 L = 10-6 M CGly-(3H) = 1 μM 25.- En cada vial hay una concentración de tolueno radiactivo: Crad = 50 μM = 50 x 10 -6 M = moltolueno/Vvial = moltolueno/10 mL moltolueno = 50 x 10-6 M x 10 x 10-3 L = 5 x 10-7 mol Stolueno = 110 mCi/mol = 0.11 Ci/mol = Atolueno/ moltolueno = Atolueno/5 x 10 -7 mol Atolueno = 5.5 x 10 -8 Ci = 122100 dpm Eficacia en el canal B = EB = RB/ Atolueno x 100 Así se puede completar la Tabla, con dos filas correspondientes a valores de Eficacia y Relación de Canales: patrón nº 1 2 3 4 5 6 μL agua 0 10 20 50 100 150 cpm (canal A) 38995 37278 34705 31975 29557 25891 cpm (canal B) 78144 70423 62312 54591 47260 39149 Eficacia (canal B) % 64.0 57.7 51.0 44.7 38.7 32.1 (canal A)/(canal B) 0.50 0.53 0.56 0.59 0.62 0.66 Con los valores calculados (que aparecen en las dos últimas filas) se construye la gráfica patrón para el carbono-14: Muestra problema: Canal A/Canal B = 3280 cpm/5460 cpm = 0.60 Interpolando en la gráfica: Eproblema = 43.5% Aproblema = Rproblema/ Eproblema x 100 = = 5460 cpm/43.5 x 100 = 12552 dpm Aproblema = 12552 dpm E (canal B) 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 re la ci ó n d e c a n a le s (A /B ) 0.48 0.50 0.52 0.54 0.56 0.58 0.60 0.62 0.64 0.66
